Diagnostico de la ciclosporosis

Los proveedores de atención médica deben considerar la Cyclospora como una posible causa de enfermedad diarreica prolongada, en particular en pacientes que hayan viajado recientemente a áreas donde la Cyclospora es endémica. En la mayoría de los laboratorios estadounidenses, las pruebas de detección de la Cyclospora no se hacen de manera rutinaria, ni siquiera cuando se hacen exámenes de heces para detectar parásitos. Por lo tanto, si fuera indicado, los proveedores de atención médica deberían solicitar específicamente la realización de exámenes de detección de la Cyclospora.

La infección por Cyclospora se diagnostica al examinar muestras de heces. Hacer el diagnóstico puede ser difícil en parte porque es posible que incluso las personas que son sintomáticas no liberen suficientes ovoquistes en sus heces como para que sean fácilmente detectables en las pruebas de laboratorio. Por lo tanto, puede que los pacientes tengan que suministrar varias muestras tomadas en diferentes días. Además, el laboratorio debe utilizar métodos sensibles de recuperación (procedimientos de concentración) y métodos de detección que hagan resaltar los ovoquistes de Cyclospora. Los ovoquistes pueden teñirse con la técnica acidorresistente modificada o la técnica de safranina modificada (“en caliente”). Los ovoquistes de Cyclospora también son autofluorescentes. Esto quiere decir que cuando se observan las muestras de heces que contienen el parásito en el microscopio de fluorescencia con luz ultravioleta (UV), los ovoquistes se ven azules o verdes (ver la imagen arriba) sobre un trasfondo negro. Los métodos de diagnóstico molecular, tales como el análisis de la reacción en cadena de la polimerasa (RCP), se utilizan para buscar el ADN del parásito en las heces.

Perspectiva adicional acerca de las pruebas de laboratorio para detectar la Cyclospora

• Los ovoquistes de Cyclospora pasan desapercibidos fácilmente; es común que haya un bajo nivel de eliminación (~1-2 logs más bajos que en las especies de Cryptosporidium). Para maximizar la recuperación de los ovoquistes de Cyclospora, primero concentre la muestra de heces —con métodos como la técnica de formalina-acetato de etilo (centrifugue por 10 minutos a 500 x g)— y luego examine la preparación húmeda o la extensión del sedimento teñido sobre un portaobjetos.
• Los ovoquistes de Cyclospora tienen ~8-10 micrometros de diámetro (en comparación, los ovoquistes de Cryptosporidium parvum/hominis tienen un diámetro de ~4-6 micrometros).
• La microscopía de fluorescencia con luz ultravioleta (filtro de excitación UV a 330-365 nm o 450-490 nm) es una técnica sensible para examinar rápidamente los sedimentos de heces a fin de detectar la presencia de ovoquistes de Cyclospora, los cuales sobresalen debido a que son autofluorescentes (los ovoquistes de Cryptosporidium parvum/hominis no lo son). Si se encuentran posibles ovoquistes de Cyclospora, puede utilizarse la microscopía de campo brillante, de contraste de fases o de contraste por interferencia diferencial para confirmar que las estructuras tengan los rasgos morfológicos característicos de los ovoquistes de Cyclospora (es decir, esferas no refractivas con citoplasma no diferenciado o glóbulos refractivos).
• En una extensión de heces teñidas con tinción acidorresistente modificada, los ovoquistes de Cyclospora por lo general son acidorresistentes variables (es decir, es posible que en el mismo campo los ovoquistes no sean teñidos o que tomen una coloración que vaya del rosa claro al rojo oscuro). Típicamente, los ovoquistes no teñidos tienen una apariencia arrugada (hialina).
• Si se utiliza la técnica de safranina modificada “en caliente”, los ovoquistes de Cyclospora se tiñen uniformemente de un color naranja rojizo brillante.

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